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Imunofluorescência


2 de dezembro de 2008


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Os ensaios de imunofluorescência são de grande importância na imunologia clínica e necessitam de considerações especiais. Trata-se de uma reação imunológica revelada com um marcador.

A primeira técnica utilizada foi a imunofluorescência direta, onde se pesquisou um antígeno em uma reação com anticorpo preparado com o fluorocromo. Para este tipo de reação são utilizados anticorpos purificados específicos para um determinado antígeno ou grupo de antígenos conjugados com um fluorocromo. Esta técnica também é chamada de técnica de camada simples.

A reação da imunofluorescência indireta, ou técnica de dupla camada (Figura 16), é realizada por antígenos fixados em uma lâmina, onde se aplica primeiro um anticorpo específico não fluorescente. E por último coloca-se um anticorpo fluorescente com especificidade marcada contra determinantes antigênicos do primeiro anticorpo utilizado para reagir com o antígeno. Esta técnica apresenta como vantagem à possibilidade de se ter uma fluorescência mais evidente, pelo fato do anticorpo fluorescente se ligar apenas aos anticorpos primários.

Outra vantagem é que por esta técnica pode-se trabalhar com vários anticorpos primários específicos para diferentes tipos de antígenos e pode-se identificar qual a classe que o anticorpo pertence.

A técnica de imunofluorescência por sanduíche recebe este nome porque o antígeno fica entre dois anticorpos. Esta técnica é aplicada para estudar tecidos linfóides e descobrir que tipo de anticorpos está sendo produzido.
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  (A)                      (B)                           (C)
Fig. 16. Imunofluorescência indireta. O Anticorpo primário marcado com um fluorocromo (A) é excitado a emitir cor (B), que é visualizado na foto de  um lâmina (C).

MARTINS, Ricardo. Imunologia Clínica. Portal Educação e Sites Associados. Disponível em:

<http://www.portalfarmacia.com.br/farmacia/cursos/cursos_detalhes.asp?id=75>. Acesso em: 01 dez. 2008.

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